醫(yī)學(xué)硬組織切片成套制備方案

1、新鮮硬組織取材固定(以牙齒為例):
根據(jù)材料尺寸/性質(zhì),通過切割機(jī)獲得所需樣本,再使用4%多聚甲醛或10%福爾馬林溶液固定至少24小時;

2、脫水浸潤:

酒精上行脫水:無水乙醇:7200=1:1; 
無水乙醇:7200=3:7;  7200原液I、II;

3、樣本包埋

光聚合法包埋:7200原液+固體包埋顆粒(12小時);配合真空冷鑲嵌機(jī)進(jìn)行抽真空,放置模具自動灌膠,去除氣泡,修復(fù)包埋樣本

CXQ-2500真空冷鑲嵌機(jī)

4、粘接樣本塊至載玻片

采用T4000樹脂粘接,并注意液體比例,配合壓合臺確保粘樣均勻

5、切割出目的切面

利用真空吸盤固定,采用切割機(jī)對包埋塊進(jìn)行切割,使其暴露出目的切面

6、目的切面打磨拋光

通過真空吸盤固定包埋塊,配合磨片機(jī)對目的切面進(jìn)行打磨拋光

7、粘接平行平面

利用光固化技術(shù),配合壓片裝置將平行載片添加到已經(jīng)過拋光處理的目的切面

8、切割獲得組織切片(厚)

使用切割機(jī)及真空吸盤再次對載片進(jìn)行分離切割,此處可獲得厚度約100微米的(厚)切片

9、磨片至所需厚度

使用磨片機(jī)對(厚)切片進(jìn)行最終磨片,使用砂紙作為介質(zhì),實(shí)時檢測磨削量,得到最終的薄片(<10μm)

10、染色封片

HE染色、甲苯胺藍(lán)染色、Ladewig染色法等對切片進(jìn)行染色,中性樹膠封片

11、組織切片顯微觀察

可使用生物顯微鏡進(jìn)行顯微圖像采集拍照